微生物是发酵的基础和核心,发酵工业的发展在很大程度上要落在微生物资源的开发和优化。因此我们有必要了解和认识一下为我们干活的这些微生物们。
而平板培养是微生物研究和发酵工业中常用的菌体分离纯化和鉴定的试验技术。
什么是平板培养
平板培养是我们科研和生产中常用的技术之一。平板培养,是指将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状,然后在此平面上接种(涂布,划线,点种,影印,倾注)微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官,并进行培养的方式称为平板培养。
平板划线法:平板划线法是微生物分离纯化的必备技能。我们常用三区、四区、之字形划线方法,对于多区划线,我们需要在转区之前将接种针上的菌用酒精灯杀灭一下,以达到获得单菌落的目的。
稀释涂布法:涂布一般和稀释同时出现,稀释涂布法是我们菌落计数的必备技能。稀释涂布中涉及到了关键操作点有:①平板培养基表面不能有太多水分,否则非常难以涂干涂匀,涂干②要换角度涂布③不要计算错稀释倍数④如果用于计数,必须保证每一步的均匀性。
不同的微生物由于其分泌物、构造、生长速度、分裂方式的不同,在平板上生长的菌落形态也是不同的。因此我们能够通过平板培养将看不到的微生物的特征放大到菌落形态上。
我们看些什么-菌落特征
不同的微生物种类,其菌落特征不同。同一种菌在不同培养条件下菌落特征也不尽相同。菌落的特征包括以下几方面:
1、大小2、颜色3、透明度4、表面状态5、质地6、边缘形态7、隆起形状(正面观)
①菌落表面的特征:光滑还是粗糙,干燥还是湿润等;②菌落的边缘特征:有圆形,边缘整齐,呈锯齿状,边缘伸出卷曲呈毛发状,边缘呈花瓣状等;③纵剖面的特征:平坦、扁平、隆起、凸起、草帽状、脐状、乳头状
不同种类微生物的形态结构
在介绍不同微生物的菌落形态前,我们先要简单了解微生物分类。根据微生物的进化水平和各种形状上的明显差异,将微生物大概分为三大类:原核微生物(真细菌和古细菌),真核微生物,非细胞微生物。
细菌:一般呈现湿润,较光滑,较透明,较粘稠,易挑取,质地均匀,颜色一般均匀无差异。这些特点都是由细菌本身的特征决定的(细胞个体间无形态和功能的差异,细胞间充满毛细管状态的水)。有鞭毛的菌落一般比较大且平坦,边缘多缺刻,形状不规则。有芽孢的一般外观比较粗糙,干燥,不透明且多褶。
常见细菌:乳酸菌,芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌
放线菌:放线菌是一类比较特殊的细菌(在分类学上属于细菌),但是其菌体形态和菌落形态其实介于细菌和霉菌之间。因此放线菌具有和细菌完全不一样的菌落形态:干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状,一般有一层薄的白色或者彩色干粉,结合紧密不易挑取,菌落正反面颜色不一样,菌落边缘有形变。
常见放线菌:链霉菌属
酵母菌:一类以单细胞存在,多数以出芽方式繁殖,能发酵糖类产能,细胞壁含有甘露聚糖,在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生存的真菌。
菌落形态:酵母菌的颜色多为乳白色或者矿烛色,少数为红色和黑色。菌落大而圆润,常有凸起,不产假丝的酵母更为凸起,酵母平板有酒香味道。
常见酵母菌有:酿酒酵母,假丝酵母,毕赤酵母,异常汉逊酵母,产朊假丝酵母。
霉菌,也可叫丝状真菌,能引起霉变。
菌落形态:霉菌一般比较好分辨,菌落较大,可沾满整个平板,有各种颜色的孢子,菌落和培养基结合牢固,不易挑落,平板正反面,菌落边缘和中心的颜色不一。
常见霉菌有:黑曲霉,黄曲霉,红曲霉,青霉,米曲霉等
常见微生物菌落形态
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